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擬南芥培養(yǎng)箱普通的培養(yǎng)和特殊培養(yǎng)方法
    
    擬南芥又名阿拉伯芥,屬十字花科,為二年生草本植物。具有植株形態(tài)小,平鋪直徑5cm,高30cm;生長區(qū)域小,易于培養(yǎng);基因組小,只有5條染色體,15700萬個(gè)堿基對(duì),27000個(gè)基因;生長速度快,周期短,一個(gè)世代大約只需要6周的時(shí)間;可自花授粉,也可以在不同種質(zhì)系間雜交,種子多,每株每世代可產(chǎn)數(shù)千粒種子等特點(diǎn)。因此,擬南芥是植物科學(xué),包括遺傳學(xué)和植物發(fā)育研究中的模式植物之一。在2000年,擬南芥成為了*個(gè)基因組被完整測序的植物。
    擬南芥培養(yǎng)箱簡單的培養(yǎng),可用于基因表達(dá)、器官發(fā)育、基因突變等研究。
    1、首先把擬南芥種子放到濾紙上,用70%酒精進(jìn)行消毒處理,再用*進(jìn)行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05% Triton X-100 非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘)。用無菌水沖洗5遍,然后將種子點(diǎn)到MS培養(yǎng)基上,pH5.9,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
    2、把種子放到4℃黑暗條件下進(jìn)行春化48h-72h左右,在長日照或短日照條件下催芽,。利用PLC控制器,編輯簡單的晝夜模式,設(shè)定光照時(shí)間16小時(shí)(黑暗8小時(shí))或者光照14小時(shí)(黑暗10小時(shí));選配Q23+連續(xù)光強(qiáng)調(diào)節(jié)裝置,設(shè)定光照強(qiáng)度為100-150umol/m2.s;設(shè)定室內(nèi)溫度為光照條件下20-22℃,黑暗條件下18-20℃;選配濕度控制系統(tǒng),設(shè)定室內(nèi)相對(duì)濕度70%。
    3、出苗大約7~10天,然后移入土中培養(yǎng),采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細(xì)作用)。在*次澆水前,可使土壤*干燥,以后每隔7~10天澆一次水。
    4、土壤可用營養(yǎng)土、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進(jìn)行混合。在生長過程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
    5、當(dāng)植株長到一定高度時(shí),可剪斷莖桿,以產(chǎn)生更多的花序,可用于轉(zhuǎn)化研究或者獲得更多的種子。
    擬南芥培養(yǎng)箱特殊培養(yǎng)
    為了加快擬南芥生長速度,在移入土壤培養(yǎng)后,可設(shè)定長日照,利用PLC控制器,編輯程序設(shè)定24h光照,光強(qiáng)100-250umol/m2.s,溫度持續(xù)22-23℃。
    擬南芥根系處理培養(yǎng),可減少光照時(shí)間為8-12h,提高光照強(qiáng)度為100-350umol/m2.s,溫度為光照條件下22-23℃,黑暗條件下18-20℃,其余培養(yǎng)條件同正常培養(yǎng)。
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